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OriginalarbeitenPhotometrische Bestimmung der Zytotoxizität von Chemikalien mit Mikrokulturen von Tetrahymena pyriformis und Pseudomonas aeruginosa Hans Ch. Huber; Ursula Ritter; Walter Huber; Wolfgang Mücke Korrespondenzautor: Hans Ch. Huber, Ursula Ritter, Walter Huber, Wolfgang Mücke, Institut für Toxikologie und Umwelthygiene der Technischen Universität München, Lazarettstr. 62, D-80636 München
Es werden zwei Testverfahren zur Bestimmung der Zytotoxizität von Chemikalien vorgestellt. Zum einen wird das Protozoon Tetrahymena pyriformis in Flüssigmedium, zum anderen das Bakterium Pseudomonas aeruginosa in Mangelmedium 18 – 20 Stunden zusammen mit den Prüfsubstanzen in Mikrotitrationsplatten mit 96 Vertiefungen kultiviert. Testparameter ist jeweils die Proliferationshemmung bzw. die Anzahl der lebenden Zellen nach Expositionsende. Ein Maß dafür ist die Umwandlung eines Tetrazoliumsalzes zu unlöslichem, blauem Formazan, welches nach Solubilisierung mit einem Detergens und Isopropanol photometrisch gemessen wird. Die EC50-Werte (mol/l) im Ciliaten-(Pseudomonaden-)Test waren für:
Cetyltrimethylammoniumbromid: 10-5,81 (10-5,08),
Benzyldimethyldodecylammoniumchlorid: 10-4,68 (10-3,80),
Dodecylbenzlsufonsäure-Natriumsalz: 10-4,50 (10-4,14),
Kaliumdichromat: 10-3,97 (10-5,11),
Toluol-4-sulfonsäure-Natriumsalz: 10-2,71 (10-2,50),
4-Nitrophenol: 10-4,00 (10-3,64),
Wegen der einfachen und schnellen Handhabung eignen sich die Verfahren für das Screening einer großen Anzahl von Proben. |
Photometric determination of the Cytotoxity of Chemicals by Microcultures of Tetrahymena pyroformis and Pseudomonas aeruginosa Hans Ch. Huber; Ursula Ritter; Walter Huber; Wolfgang Mücke Corresponding author:: Hans Ch. Huber, Ursula Ritter, Walter Huber, Wolfgang Mücke, Institut für Toxikologie und Umwelthygiene der Technischen Universität München, Lazarettstr. 62, D-80636 München
Two test methods are presented to assess the cytotoxicity of chemicals. On one hand the protozoon Tetrahymena pyriformis and on the other the bacterium Pseudomonas aeruginosa is cultured in defined media containing the test chemicals. Test parameter is the quantity of living cells surviving exposure. The conversion of the tetrazolium salt MTT into formazan is equivalent to cell viability. A mixture of detergent and isopropanol is used to dissolve the blue formazan which is not soluble in water, prior to photometric measurement. For cetyltrimethylammonium bromide, benzyldimethyldodecylammonium chloride, dodecylbenzenesulfonic acid sodium salt, potassium dichromate, 4-toluenesulfonic acid sodium salt, and 4-nitrophenol the EC50-values (mol/l) in the Tetrahymena pyriformis– (Pseudomonas aeruginosa) test system were: 10-5,81 (10-5,08); 10-4,68 (10-3,80); 10-4,50 (10-4,14);
10-3,97 (10-5,11); 10-2,71 (10-2,50) and 10-4,00 (10-3,64). – With the assays described here it is possible to measure a large number of samples by quick and simple means. |
6 UWSF (5) 251-253 (1994)
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